ГОСТ Р 50846-96 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методика измерения массовой доли аммиака в рыбе
22.07.2015
ГОСТ Р 50846-96 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методика измерения массовой доли аммиака в рыбе

ГОСТ Р 50846-96


Группа Н29

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

РЫБА, МОРСКИЕ МЛЕКОПИТАЮЩИЕ, МОРСКИЕ БЕСПОЗВОНОЧНЫЕ И ПРОДУКТЫ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ

Методика измерения массовой доли аммиака в рыбе

Fish, sea mammals, sea invertebrates and products of their treatment. Methods of measuring ammonia mass fraction in fish

ОКС 67.120.30 71.040.10* ОКСТУ 9209 _______________ * В указателе "Национальные стандарты" 2010 год ОКС 67.120.30. - Примечание изготовителя базы данных.

    Дата введения 1997-01-01

Предисловие

    1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом прудового рыбного хозяйства (ВНИИПРХ)

ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 300 "Рыбные продукты пищевые, кормовые, технические и упаковка"

    2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 10 января 1996 г. N 12

    3 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

    4 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июнь 2010 г.

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на рыбное сырье и рыбную продукцию (рыба холодного копчения и соленая) и устанавливает методы измерения массовой доли аммиака: фотометрический и обратного титрования избытка трихлоруксусной кислоты.

Данная методика предназначена для производственных лабораторий и лабораторий Службы лабораторного контроля Комитета Российской Федерации по рыболовству.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3769-78 Реактивы. Аммоний сернокислый. Технические условия

ГОСТ 4108-72 Реактивы. Барий хлорид 2-водный. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 4517-87 Реактивы. Методы приготовления вспомогательных реактивов и растворов, применяемых при анализе

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 7631-2008 Рыба, нерыбные объекты и продукция из них. Методы определения органолептических и физических паказателей

ГОСТ 7636-85 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 21239-93 Инструменты хирургические. Ножницы. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 21240-89 Скальпели и ножи медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 21400-75 Стекло химико-лабораторное. Технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 22180-76 Кислота щавелевая. Технические условия

ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия ________________ * С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001 ( На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008).

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 31339-2006 Рыба, нерыбные объекты и продукция из них. Правила приемки и методы отбора проб

3 Отбор проб

    3.1 Отбор проб на анализ проводится по ГОСТ 7631, ГОСТ 31339.

    3.2 Пробы рыб отбирают в разных местах холодильной камеры, включая участки, близко расположенные к месту утечки аммиака. В местах складирования пробы отбирают с внешних поверхностей блока, бурта, штабеля. В месте взятия пробы отбирают несколько рыб общей массой 300 г.

    3.3 Отбор проб проводят с помощью ножей, пинцетов и другого инвентаря.

    3.4 Подготовка к анализу средней пробы проводится по ГОСТ 7636.

    3.5 Пробы помещают в герметично закрываемые стеклянные банки, снабженные этикеткой с указанием:

- даты отбора пробы;

- номера холодильной камеры или места взятия пробы;

- наименования рыбного сырья или продукции;

- количества проб;

- предназначения проб;

- должности, фамилии, имени и отчества лиц, отбиравших пробы на анализ.

    3.6 Этикетки пишут на пергаментной бумаге простым карандашом и дублируют в журнале отбора проб.

    3.7 Контрольную (не подвергшуюся воздействию паров аммиака) пробу отбирают массой 300 г по 3.3-3.6.

    3.8 Пробы рыбного сырья и рыбной продукции, если они не могут быть проанализированы сразу, хранят при температуре от 0 до 4 °С. Срок хранения - не более двух суток.

4 Фотометрический метод

    4.1 Аппаратура, материалы, реактивы

Бюксы стеклянные с притертой пробкой вместимостью 50 см’ по ГОСТ 25336.

Банки стеклянные широкогорлые с крышкой вместимостью 1000 см' по ГОСТ 25336.

Весы аналитические 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Воронки химические диаметром 3. 5, 7 см по ГОСТ 25336.

Колбы мерные вместимостью 50, 100. 1000 см' с шлифом по ГОСТ 1770.

Пробирки градуированные вместимостью 10 см' по ГОСТ 25336.

Пипетки вместимостью 1, 2. 5. 10 см' по ГОСТ 29227.

Палочки стеклянные диаметром 2-4 мм разной длины по ГОСТ 21400.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Ножницы по ГОСТ 21239.

Пинцеты по ГОСТ 21241.

Скальпели по ГОСТ 21240.

Микроизмельчитель тканей РТ-2.

Фотоэлектроколориметр любой марки.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота серная по ГОСТ 4204.

Аммоний сернокислый по ГОСТ 3769.

Реактив Несслера по ГОСТ 4517.

Все реактивы должны быть х.ч. или ч.д.а. Допускается использование других средств измерений, материалов и реактивов, по своим характеристикам не уступающих указанным выше.

    4.2 Сущность метода

Метод основан на способности аммиака образовывать окрашенное в желто-коричневый цвет соединение с реактивом Несслера 1. Интенсивность окраски раствора, пропорциональная массовой доле аммиака, измеряют на фотоэлектрическом колориметре при длине волны 400-440 нм.

Минимально определяемое значение массовой доли аммиака в рыбе составляет 0,05%.

   4.3 Подготовка к измерениям

4.3.1 Приготовлениебезаммиачной дистиллированной воды

Дистиллированную воду проверяют на содержание аммиака. Для этого к 5 см’ волы прибавляют 0,1см1 реактива Несслера. При обнаружении аммиака (появляется желтоватое окрашивание) дистиллированную воду пропускают через колонку с активированным углем марки БАУ. катионитом в Н'-форме или кипятят в колбе до уменьшения объема на ■/, и снова проверяют на отсутствие аммиака.

Эту воду используют для приготовления реактивов и разбавления пробы.

4.3.2 Применяют готовый реактив Несслера или готовят его по ГОСТ 4517 с помощью безамми-ачной полы.

4.3.3 Приготовление основного стандартного раствора

0.236 г сернокислого аммония (МН() БО{. предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 105 *С, растворяют в мерной колбе вместимостью 500 см1 в небольшом количестве безаммиачной дистиллированной воды и доводят водой до метки. В 1 см4 этого раствора содержится 0.1 мг азота. Раствор хранят в склянке из темного стекла в течение полугола, если нет помутнения, хлопьев, осадка.

4.4 Построение граду ировочного графика

В шесть мерных колб вместимостью 50 см' каждая вносят: 0: 0,25; 0.5; 1.0: 1,5; 2.0 см' стандартного раствора, добавляют 25—30 см3 дистиллированной воды и 4 см3 реактива Несслера, доводят объем дистиллированной водой до метки, тщательно перемешивают и через 10 мин колориметри-руют на фотозлектроколориметре в кюветах с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 440 нм. Полученные растворы содержат 0; 0.025; 0,05; 0,1; 0,15; 0,20 мг азота в 1см3. По полученным результатам строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс массовые доли аммиака, мг/см\ а по оси ординат — соответствующие им значения оптической плотности. График должен иметь прямолинейный характер.

4.5 Проведение измерений

Из каждой отобранной пробы взвешивают три навески костно-кожно-мышечного препарата массой 1.0 г, округляя с точностью до 0.0001 г. Навески заливают 10 см' 0.1 и. раствора серной кислоты и гомогенизируют на микроизмельчителе ГГ-2 в течение 30 с. Полученные гомогенаты фильтруют через бумажные фильтры в градуированные пробирки. Количество фильтрата в каждой пробирке доводят 0,1 и. раствором серной кислоты ло 10 см3. Затем из каждой пробирки берут 1 см1 фильтрата и переносят в соответствующие мерные колбы объемом 50см\ В каждую мерную колбу добавляют по 20 — 30 см' дистиллированной воды и 4 см' реактива Несслера. После чего объем содержимого колб доводят дистиллированной водой до метки. Раствор тщательно перемешивают и через 10 мин колори-метрнруют на фотозлектроколори метре в кюветах с толщиной оптического слоя 20 мм при длине полны 440 им.

Раствором сравнения служит смесь из 4 см3 реактива Несслера и дистиллированной воды, приготовленная в мерной колбе объемом 50 см1.

Аналогично проводят измерение массовой доли аммиака в контрольных (не подвергшихся воз-действию паров аммиака) пробах.

4.6 Обработка результатов

Сначала рассчитывают массовые доли азота А’, и /У,. %, в контрольной (не подвергшейся воздействию паров аммиака) и опытной (подвергшейся воздействию паров аммиака) пробах по формулам:

/ц-У -Аф 100

= А/, ТШ ’>

к, «2 Г- Ар 100 - * 1000 ' концентрации азота в опытной и контрольной пробах, найденные по градуировочному графику, мг/см3; объем фильтрата, см3;

— коэффициент ра)ведення;

массы опытной и контрольной проб, г; коэффициент пересчета миллиграммов в граммы. (I) (2) где п1 и п}

У

*

1,21 - коэффициент пересчета массовой доли азота на массовую долю аммиака.

За результат измерений принимают среднеарифметическое значение трех измерений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 10%. Вычисления проводят с точностью до второго десятичного знака.

Гранины интсриала абсолютной погрешности измерений массовой доли аммиака при доверительной вероятности Р= 0.95 рассчитывают по формуле

Д= ±(0,018 + 0,077 А), (4|

где А — результат измерений массовой доли аммиака.

5 Метод обратного титрования избытка трихлоруксусной кислоты

5.1 Аппаратура, материалы, реактивы

Бюксы стеклянные с притертой пробкой вместимостью 50 см' по ГОСТ 25336.

Бюретки вместимостью 50 см’ по ГОСТ 25336.

Весы аналитические 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Воронки химические по ГОСТ 25336.

Колбы мерные вместимостью 50. 100 и 1000 см’ по ГОСТ 1770.

Цилиндры мерные вместимостью 25 и 50 см’ по ГОСТ 1770.

Пробирки градуированные вместимостью 10 см’ по ГОСТ 25336.

Микроизмельчитель тканей 1гГ-2.

Ножницы по ГОСТ 21239.

Пинцеты по ГОСТ 21241.

Скальпели по ГОСТ 21240.

Фильтры бумажные по ГОСТ 12026.

Бария хлорид по ГОСТ 4108.

Кислота серная по ГОСТ 4204.

Кислота трихлоруксусная |2|.

Кислота щавелевая 0.1 и. по ГОСТ 22180.

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328.

Фенолфталеин |3|.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кальция хлорид 111.

Все реактивы должны бьть  х.ч. или ч.л.а. Допускается использование других средств измерений, материалов и реактивов, по своим характеристикам не уступающих указанным выше.

5.2 Сущность метола

Метод основан на способности трихлоруксусной кислоты (ТХУ К) связывать свободный аммиак. Избыток ТХУ К опитровывают 0.1 н. раствором гидрооксида натрия в присутствии индикатора фенолфталеина.

Минимально измеряемое значение массовой доли аммиака в рыбе составляет 0.6 %.

5.3 Подготовка к измерениям

5.3.1 Приготовление безаммиачнной дистиллированной волы См. 4.3.1.

5.3.2 Приготовление 5 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУК)

5.0 г трихлоруксусной кислоты растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см’ в небольшом количестве безаммначной дистиллированной воды и доводят объем водой до метки.

  5.3.3 Приготовление 0.1 и. раствора гидроксида натрия

Гранулы гидроксида натрия помешают в стакан и обмывают 2—3 раза небольшими порциями дистиллированной воды, каждый раз сливая ее и заменяя свежей. При этом большая часть соды, содержащейся на поверхности гранул, растворится. После этого быстро взвешивают на технических весах требуемое количество гранул. Во избежание порчи весов при взвешивании гранулы помешают на кусок полиэтиленовой пленки. Навеску гранул помешают в мерную колбу вместимостью 1 дм1.

Для приготовления 1 дм1 0.1 н. раствора гидроксида натрия нужно 4 г гранул, но с уметом содержащейся в них воды необходимо взять 4.5 г. Гранулы помешают в мерную колбу, растворяют дистиллированной водой и доводят объем водой до метки.

К полученному раствору добавляют 10—15 см' 2 и. раствора хлорида бария до появления осадка,

который отстаивают в течение суток. После этого проверяют полноту осаждения ионов СО'*, мешающих титрованию. Дш этого к 1 — 2см‘ прозрачного раствора гидроксида натрия приливают 1—2 см' раствора серной кислоты. Образование мути свидетельствует о том, что ноны СО ] осаждены полностью.

Полученный раствор гидроокиси натрия защищают от поглощения СО. из воздуха с помощью прокаленного хлорида кальция, помешенного в хлоркальциевую трубку.

5.3.4 Определение поправочного коэффициента раствора гидроксида натрия по щавелевой кислоте.

В три колбы вместимостью 100 см ‘ каждая помешают по 25 см' 0.1 н. раствора щавелевой кислоты, приготовленного из фиксанала, прибавляют 8—10 капель фенолфталеина и оттитровываюг раствором гидроксида натрия. Появляющаяся при этом розовая окраска раствора должна быть устойчивой в течение 30 с.

Поправочный коэффициент А' 0,1 н. раствора гидроксида натрия рассчитывают по формуле (5)

где У— объем раствора гидроксида натрия, израсходованный на титрование 25 см' 0.1 н. растворе щавелевой кислоты. см'.

Результат рассчитывают как среднее арифметическое значение трех определений. Вычисления производят с точностью до второго десятичного знака.

5.4 Проведение измерений

Из каждой отобранной пробы взвешивают три навески костно-кожно-мышечного препарата массой 1.0 г. округляя с точностью до 0.0001 г. Навески заливают 10 см’ 5 %-ного раствора трихлорук-сусной кислоты и гомогенезируют на микроизмельчителе Р Г-2 в течение 30 с. Полученные гомогенаты фильтруют через бумажные фильтры в градуированные пробирки. Объем фильтрата в каждой пробирке доводят 5 %-ным раствором трихлоруксусной кислоты до 10 см1.

В коническую колбу вместимостью 100 см’ отбирают по 2 см’ фильтрата каждой из анализируемых проб, добавляют 2 капли 1 %-ного раствора фенолфталеина и титруют 0.1 н. раствором гидроокси-да натрия до появления пеисчезающей розовой окраски.

Аналогично проводят определение массовой доли аммиака в контрольных (не подвергшихся поздейслшю паров аммиака) пробах.

5.5 Обработка результатов

Сначала рассчитывают массовые дат и аммиака Л1 и А}, %, в опытной (подвергшейся воздействию паров аммиака) и контрольной (не подвергшейся воздействию паров аммиака) пробах по формулам: (Г'о - К 0.0017 - К 100

А = ттг, : (И„ - Г,)-А 0.0017 V ■ 100

Л'- = —7ТГ. (7)

где У. — объем 0.1 н. раствора гидрооксида натрия, израсходованный на титрование 2 см15 %-ного раствора ТХУК. см1;

У1 и У, — объем 0.1 н. раствора гидроокиси натрия, израсходованный на титрование 2 см3 фильтрата опытной и контрольной проб, см';

К поправочный коэффициент концентрации гидроксида натрия;

0.0017 — коэффициент пересчета на аммиак,

V — объем фильтрата, см3;

2 объем фильтрата анализируемых проб, взятый для титрования, см1;

Л/ и Л/, — навески опытной и контрольной проб. г.

По разнице массовых долей аммиака в опытной и контрольной пробах рассчитывают массовую долю аммиака, поглощенного мясом рыбы. А, %, по формуле

А - Л1 - Ау (8) где А, и А, см. формулы 6 и 7.

За результат измерений принимают среднее арифметическое значение результатов трех измерений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 30%. Вычисления производят с точностью до второго десятичного знака.

Гранины интервала абсолютной погрешности измерений массовой доли аммиака при доверительной вероятности Р~ 0.95 рассчитывают по формуле

Д = ± (0.45 + 0,44 Л ), (9)

где А — результат измерений массовой доли аммиака.

Результат расчета погрешности округляют до второго десятичного знака.

6 Меры предосторожности при работе с зараженными пробами

Все работы по определению аммиака в пробах рыбы осуществляют в действующем вытяжном шкафу, скорость тяги воздуха в котором должна быть не менее 1,0 м/с при подъеме половины штор на высоту 35 см.

Работу с зараженными пробами выполняют в халате из плотной ткани, в фартуке из полимерной пленки или прорезиненной ткани, в резиновых перчатках и нарукавниках из полимерной пленки.

После работы перчатки, не снимая с рук, тщательно обмывают водой с мылом, затем снимают и моют руки.

Каждый работник лаборатории должен иметь подогнанный и проверенный личный противогаз, снабженный коробкой марки КД.

Для нейтрализации рыбных отходов, зараженных аммиаком, используют 1-20%-ные растворы соляной, серной, азотной и других кислот, а также воду.

ПРИЛОЖЕНИЕ А (справочное). Библиография

ПРИЛОЖЕНИЕ А (справочное)

[1] - ТУ 6-01-20-66-89 Хлорат-хлорид кальция

[2] - ТУ 6-09-1926 Трихлоруксусная кислота, чистая

[3] - ТУ 6-09-5360-88 Фенолфталеин. Индикатор